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新型 動物疫病血凝分析儀

更新時間:2019-01-17點擊次數:515

動物疫病血凝分析儀(yi) 型號:DY-7000

DY-7000動物疫病血凝分析儀(yi) 廣泛於(yu) 動物疫病預防控製中心、動物防疫監督所、獸(shou) 醫藥品監察所、獸(shou) 醫研究所、大學、疫苗生產(chan) 和大中型飼養(yang) 企業(ye) 等單位。 
DY-7000動物疫病血凝分析儀(yi) 是根據國標中重大疫病免疫監測方法研製的設備,配套使用自動血凝分析管理軟件,能自動監測常見重大動物疫病的免疫抗體(ti) 效價(jia) ,及時掌握動物疫病流行規律和疫情動態,建立動物免疫效果監測記錄檔案。係統當前監測項目有:豬瘟抗體(ti) 正向間接血凝檢測、口蹄疫抗體(ti) 正向間接血凝檢測、高致病性禽流感H5亞(ya) 型抗體(ti) 血凝抑製檢測、高致病性禽流感H7亞(ya) 型抗體(ti) 血凝抑製檢測、高致病性禽流感H9亞(ya) 型抗體(ti) 血凝抑製檢測、新城疫抗體(ti) 血凝抑製檢測。 

試驗方法: 
1 血凝(HA)試驗 
1) 在V型微量反應板的1~12孔均孔加入0.025ml PBS,換滴頭。 
2) 吸取0.025ml血凝抗原加入孔,混勻。 
3) 從(cong) 第1孔吸取0.025ml血凝抗原加入第2孔,混勻後吸取0.025ml加入第3孔,如此進行對倍稀釋至第11孔,從(cong) 第11孔吸取0.025ml棄去,換滴頭。 
4) 每孔再加0.025ml PBS。 
5) 每孔均加入0.025ml 1%(V/V)雞紅細胞懸液(將雞紅細胞懸液充分搖勻後加入)。 
6) 將反應板在振蕩器上震蕩1~2分鍾或輕扣反應板混合反應物,在室溫(20~25℃)下靜置40分鍾後觀察結果,(如果環境溫度太高,可置4℃環境下),在對照孔紅細胞顯著呈鈕扣狀時判定結果。 
7) 結果判定  將板傾(qing) 斜,觀察紅細胞有無呈淚滴狀流淌。*血凝(不流淌)的抗原或病毒高稀釋倍數代表一個(ge) 血凝單位(HAU)。 
2  血凝抑製(HI)試驗 
1) 根據HA試驗測定的效價(jia) ,計算配製4個(ge) 血凝單位(4HAU)抗原。以*血凝的病毒高稀釋倍數作為(wei) 終點,終點稀釋倍數除以4即為(wei) 含4HAU抗原的稀釋倍數。例如,HA效價(jia) 為(wei) 1:256,則4HAU抗原的稀釋倍數應是1:64(256除以4)。 
2) 加稀釋液: 
在微量反應板的第1~11孔加入0.025ml PBS,第12孔加入0.05ml PBS。 
3) 稀釋待檢血清: 
取1號待檢血清0.025ml加入排第1孔,充分混勻後吸0.025ml於(yu) 第2孔,依次對倍稀釋至第10孔,從(cong) 第10孔吸取0.025ml棄去。 
取2號待檢血清加入第2排;取3號待檢血清加入第3排……均按上法稀釋。 
  注意!每取一份血清時,必須更換吸頭。 
4) 稀釋陰性血清: 
  在血凝板的第7排孔加陰性血清0.025ml,對倍稀釋至第3孔,混勻後從(cong) 該孔取出0.025ml棄去。 
    5) 稀釋陽性血清: 
  在血凝板的第8排第1孔加陽性血清0.025ml,對倍稀釋至第10孔,混勻後從(cong) 該孔取出0.025ml棄去。 
6) 第1~11孔均加入含4HAU混勻的病毒抗原液0.025ml,在室溫(20~25℃)下靜置30分鍾或2~8℃ 50分鍾。 
7) 每孔加入0.025ml 1%(V/V)的雞紅細胞懸液,震蕩混勻,在室溫(20~25℃)下靜置20~30分鍾或2~8℃ 45~60分鍾,對照紅細胞將呈明顯鈕扣狀沉於(yu) 孔底。 
結果判定  
以*抑製4 HAU抗原的高血清稀釋倍數判為(wei) 該血清的HI效價(jia) 。 
隻有陰性對照孔血清滴度不大於(yu) 2log2,陽性對照血清誤差不過1個(ge) 滴度,試驗結果才有效。 
禽流感滅活疫苗的免疫效果判定:家禽免疫後21天進行免疫效果監測。禽流感抗體(ti) 血凝抑製(HI)抗體(ti) 效價(jia) ≥24判定為(wei) 合格 
存欄家禽抗體(ti) 合格率達到≥70%判定為(wei) 合格。 
新城疫免疫效果監測:免疫21天後,進行免疫效果監測。抗體(ti) 血凝抑製試驗抗體(ti) 效價(jia) ≥25判定為(wei) 合格 
存欄家禽抗體(ti) 合格率達到≥70%判定為(wei) 合格。 

【注意事項】  
(1)HA和HI試驗影響因素甚多,應嚴(yan) 格控製試驗條件。每加一試劑或樣品後需更換吸頭,同時應嚴(yan) 格控製作用溫度和時間。 
(2)準確配製紅細胞懸液,使用時應隨時振搖。 
(3)用pH值7.0~7.2的PBS作為(wei) 稀釋液。 
(4)抗原和陰、陽性血清若有汙染,應廢棄。 
(5)準確配製4HAU抗原,使用前需進行滴定,滴定好的抗原應在2小時內(nei) 用完。 
(6)抗原和血清按規定保存。凍幹試劑應按規定的體(ti) 積用PBS溶解。溶解後2~8℃保存不過1個(ge) 月;可分裝成小包裝,-70℃凍存,隨用隨取。切忌反複凍融。 
(7)鴨、鵝以及哺乳動物的血清一般需進行非特異性凝集和抑製素的處理。 
(8)同一亞(ya) 型不同毒株的HI試驗抗原,若抗原性存在差異,則檢測同一血清的HI效價(jia) 不同。 
(9)在使用微量加樣器時,槍頭進入試劑瓶麵下約2~3ml深處,不可過深。待槍頭撤出液麵後斜貼在試劑瓶的瓶壁上,淌走多餘(yu) 的液體(ti) ,防止形成液滴滴入凝集板孔中。 
(10)雞紅細胞懸液是現配現用,剩餘(yu) 的放於(yu) 4℃保存,如果出現溶血現象則不能使用。 
(11)每次檢測可隻做一份陰陽性血清對照試驗。 
(12)試驗完成後立即上機判讀,否則易出現紅細胞下滑現象。 
(13)凍幹對照血清和抗原存放於(yu) -20℃,溶解過後存放於(yu) 4℃。